عناوين
منشور

اختبارات لتحديد الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض والانتهازية

اختبارات لتحديد الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض والانتهازية

المكورات العنقودية من الناحية الشكلية ، المكورات العنقودية هي إيجابية الغرام cocci تقع في شكل مميزة "مجموعات من العنب". المكورات العنقودية المسببة للأمراض في مستعمرات أجار الدم التي يبلغ قطرها 2 - 3 مم ، وتحيط بها منطقة انحلال الدم شفافة. على أجار حليبي أو ملح صفار البيض - مستعمرات محاطة بمنطقة التنوير (نشاط البروتين) وهالة قوس قزح (وجود إنزيم - lecitovitellase).

تزرع المستعمرات المشبوهة على آجار بيبتون اللحوم المشطوف لعزل الثقافة النقية. بعد حضانة 24 h عند درجة حرارة 37 ° C ، يتم اختبار نشاط تخثر البلازما للثقافة من خلال الزرع في أنابيب باستخدام 0,5 مل من بلازما سيترات (بشري أو أرنب) في تخفيف 1: 4. المكورات العنقودية المسببة للأمراض تتخثر البلازما ل 2 - 24 h في ظل ظروف الحرارة. تتم المحاسبة من خلال 1 و 2 و 4 ومن ثم 24 ساعة لتشكيل جلطة صغيرة تشبه الهلام في أسفل الأنبوب. تخضع المكورات العنقودية المحددة لكتابة فجرية عندما يكون ذلك ضروريًا لتحديد مصدر حدوث عدوى المكورات العنقودية والممرات.

المكورات العقدية أحد الممثلين - Str.viridans (العقدية الخضراء) - ساكن دائم غير مُمْرِض للبلعوم. في أجار الدم العقدية ، فإنها تشكل مستعمرات رمادية صغيرة (منقط) مع منطقة شفافة من انحلال الدم (P ~ الانحلالي) ومستعمرات مع هالة بني مخضر وزيادة شفافية المتوسطة (الأخضر). في أجار الدم ، غالبا ما يتم كبح نمو المكورات العقدية عن طريق نمو الخلايا الدقيقة الأخرى. لذلك ، من الأفضل الاحتفاظ بسجلات على الكؤوس مع الوسائط الاختيارية - Garro و Turzhetsky ، حيث تمت إضافة اللون البنفسجي الجنتي لقمع النباتات المصاحبة ، والتي لها خصائص بكتيرية في احترام saprophytes من الهواء. يتم زراعة في 37 ° C. بعد عد المستعمرات المزروعة من المكورات العقدية المشبوهة ، تصنع المسحات (المكورات العقدية يتم ترتيبها في سلاسل قصيرة أو عناقيد) ثم يتم زرعها في أجار الدم أو في مرق السكر. في المرق ، سلاسل المكورات العقدية ، والتي يجب التأكد منها باستخدام الفحص المجهري للطاخات المحضرة من الرواسب السفلية المميزة (في شكل رقائق أو فتات في أسفل الأنبوب مع مرق واضح).

أنشأ تجريبيا العلاقة التالية: إذا كان x 2 لوحات بعد التعرض لدقائق 20 2 المتقدمة المستعمرات، ويعتبر الهواء النقي إذا 3-4- الملوثة ضعيف. في فصولهم الباحثين المدرسة التقاط ما يصل إلى خلايا 50000 من العقدية المخضرة في 1m3.

يتم زرع مستعمرات Escherichia coli من وسط Endo في مرق اللاكتوز مع حمض البوريك أو في وسط المرارة اللاكتوزية ذات اللون الأخضر اللامع ، مسخن حتى 43-44 ° С (في حمام مائي) ، وبعد البذر مباشرة ، يتم وضع أنابيب دافئة في ترموستات في 43 ° C على 24 h. حمض البوريك والأخضر اللامع ، إضافة إلى الوسائط ، مثبطات للنباتات المصاحبة. يشير مظهر تكوين الغاز إلى وجود الإشريكية القولونية في ماء الاختبار. إذا لم يكن من الممكن أن تزرع في مرق اللاكتوز مع حمض البوريك ، يتم تحديد E. coli وفقًا لخاصيتين: تخمير اللاكتوز عند 44,5 ° C خلال 24 h والقدرة على تكوين الإندول. في هذه الحالة ، يتم تصنيف مستعمرات E. coli المشبوهة في أنابيب 2: واحدة مع وسيطة شبه سائلة مع اللاكتوز ، والثانية مع وسيط لتحديد الإندول (مرق Hottinger ، أو ماء بيبتون أو وسيط آخر يحتوي على التربتوفان) ، يتم إدخال ورقة مؤشر تحت أنبوب الاختبار indole والمحتضنة في 44,5 ° C. زرع في أنابيب الاختبار مع البيئة FKP-1 تحديد تبسيط منذ في هذا الوسط يحتوي على اللاكتوز والتربتوفان. ويرد ردا إيجابيا من تشكيل الغاز (التحلل اللاكتوز) والإندول (التخمير التربتوفان).

غريغرسن اختبار هذا الاختبار يمكن الاستعاضة عن غرام وصمة عار. انخفاض 3٪ مائي KOH على شريحة مستحلب كتلة البكتيرية مأخوذة من المتوسطة كثيفة. بعد بضع ثوان، بعد التحريك لمدة المخاطية الحلقات تمتد الغزل، مشيرا إلى أن مستعمرات تابعة لدراسة الأنواع سالبة الجرام. لا تتشكل غرام (+) البكتيريا المواضيع المخاطية.

الكاتلاز اختبار تطبيق قطرة من 1-2 3 بيروكسيد الهيدروجين٪ مباشرة على مستعمرة التحقيق. ظهور فقاعات يشير إلى أن البكتيريا المعزولة الكاتالاز.

اختبار أوكسيديز: يتم الاختبار باستخدام مستعمرات الكائنات الحية الدقيقة التي تنمو على وسط إندو. يتم نقل جزء من المستعمرات المشبوهة بواسطة حلقة معقمة على ورقة تصفية مشربة مع الكاشف: ثنائي ميثيل- ع-إينيلينيديامين وأنافتول. إذا نمت الكائنات الحية الدقيقة على المرشح تنبعث من أوكسيديز ، يتغير لون المستعمرة إلى اللون الأزرق البنفسجي بعد دقائق 2 - 5. لا تؤخذ هذه المستعمرات في الاعتبار عند تحليل المياه. من الممكن تراكب الفلتر بالكامل مع المستعمرات التي نمت عليه على ورق الترشيح مع المؤشر. لا تغير مستعمرات تلاشي اللون الأحمر الداكن لونها (بما أن الإشريكية القولونية سلبية الأكسيد) ويتم اعتبارها ممثلة للتلوث البرازي بالمياه.

في الحالات المشكوك فيها ، في وجود مستعمرات وردية اللون أو عديمة اللون (سلبية اللاكتوز) لا تمتلك نشاط أوكسيديز ، يتم تحديد قدرة البكتيريا على تخمير الجلوكوز عند درجة حرارة 37 ° C وإظهار نشاط التحلل البروتيني على وسط Endo مع الحليب. يتم حساب المستعمرات على أنها BGKP ، إذا تم تشكيلها بواسطة قضبان سالبة الجرام ، والتي تخمر الجلوكوز إلى الحمض والغاز ولا تمتلك نشاطًا بروتينيًا.

قائمة الأدب الموصى بها

1. Mudretsova-Wiss، K.A.، Kudryashova، A.A، Dedyukhina، V.P. علم الأحياء الدقيقة والصرف الصحي والنظافة: دراسات. للجامعات. -7 إد. - M: دار نشر الأعمال الأدب ، 2001. - 388 مع.

2. علم الأحياء الدقيقة الصحي / N.V. بيليتوفا ، ر. كورنيليف ، إل. Kostrikina et al. Ed. SY Lyubashenko. - M .: Pishch.pr-st ، 1980.-352 with.

3. مارموزوفا إل. أساسيات علم الأحياء الدقيقة ، والصرف الصحي والنظافة في صناعة المواد الغذائية. - M: IRPO ، أكاديمية ، 2000. - 132 مع.

4. فومين جي. المياه. مراقبة السلامة الكيميائية والبكتيرية والإشعاعية وفقًا للمعايير الدولية: مرجع موسوعي. - 3 ed.، Pererab. وأضف. - M: دار النشر "حامي" ، 2000. - 848 مع.

5. أساسيات علم الأحياء الدقيقة ، علم الفيروسات والمناعة. إد. إيه. فوروبيفا ، يو. كريفوشينا. - M: المهارة ، SHK العالي ، 2001.-224 مع.

6. علم الأحياء الدقيقة الصحي وعلم الفيروسات / Z.N. Kochemasova، S.A. Efremova ، AM Rybakov - M: الطب ، 1987. - 352 مع.

7. التحليل الصحي والميكروبيولوجي لمياه الشرب: مبادئ توجيهية. - M: المركز الفيدرالي للرقابة الصحية والوبائية التابعة لوزارة الصحة الروسية ، 2001. - 42 مع.

8. محدد البكتيريا بورغي. في 2-s.: Trans. مع الإنجليزية. / إد. جيه هولت وآخرون - م: مير ، 1997.

9. طرق علم البكتريا العام: في 3's t.- Per. من الانجليزية / إد. F. Gerhardt et al. - M: Mir، 1983.

إضافة تعليق

لن يتم نشر عنوان بريدك الإلكتروني. Обязательные поля помечены *

هذا الموقع يستخدم Akismet لمكافحة البريد المزعج. تعرف على كيفية معالجة بيانات تعليقك.