اختبارات لتحديد الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض والانتهازية

اختبارات لتحديد الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض والانتهازية

المكورات العنقودية من الناحية الشكلية ، المكورات العنقودية هي إيجابية الغرام cocci تقع في شكل مميزة "مجموعات من العنب". المكورات العنقودية المسببة للأمراض في مستعمرات أجار الدم التي يبلغ قطرها 2 - 3 مم ، وتحيط بها منطقة انحلال الدم شفافة. على أجار حليبي أو ملح صفار البيض - مستعمرات محاطة بمنطقة التنوير (نشاط البروتين) وهالة قوس قزح (وجود إنزيم - lecitovitellase).

من المستعمرات المشبوهة على القيام بذر المنحدرة أجار عادي لعزل ثقافة نقية. بعد 24 ساعة حضانة في 37 ° C التحقق منها ثقافة النشاط تخثر البلازما البذر في أنابيب اختبار مع 0,5 مل بلازما سيتراتية (الإنسان أو أرنب) المخفف 1: 4. تكاثفت المكورات العنقودية المسببة للأمراض البلازما لساعات 2-24 تحت الحرارة. إنتاج المحاسبة من خلال 1، 2، ساعات 4 24 ومن ثم تشكيل جلطة هلامية صغيرة على الجزء السفلي من الأنبوب. معزولة المكورات فج الكتابة تخضع إذا لزم الأمر إنشاء مصدر حدوث العنقوديات العدوى وانتشار المسارات.

المكورات العقدية أحد الممثلين - Str.viridans (العقدية الخضراء) - ساكن دائم غير مُمْرِض للبلعوم. في أجار الدم العقدية ، فإنها تشكل مستعمرات رمادية صغيرة (منقط) مع منطقة شفافة من انحلال الدم (P ~ الانحلالي) ومستعمرات مع هالة بني مخضر وزيادة شفافية المتوسطة (الأخضر). في أجار الدم ، غالبا ما يتم كبح نمو المكورات العقدية عن طريق نمو الخلايا الدقيقة الأخرى. لذلك ، من الأفضل الاحتفاظ بسجلات على الكؤوس مع الوسائط الاختيارية - Garro و Turzhetsky ، حيث تمت إضافة اللون البنفسجي الجنتي لقمع النباتات المصاحبة ، والتي لها خصائص بكتيرية في لالفطور الرمامة الهواء. ويتم زراعة بها في 37 درجة مئوية. بعد عد المستعمرات من يشتبه العقدية جعل مسحات (تقع العقديات سلاسل قصيرة أو مجموعات) ثم subcultured على أجار الدم أو في مرق السكر. سلاسل شكل مرق العقديات، ما الذي ينبغي التحقق منها من قبل مسحات المجهر أعدت من سمة من الرسوبيات (في شكل رقائق أو الفتات في الجزء السفلي من الأنابيب مع مرق شفافة).

أنشأ تجريبيا العلاقة التالية: إذا كان x 2 لوحات بعد التعرض لدقائق 20 2 المتقدمة المستعمرات، ويعتبر الهواء النقي إذا 3-4- الملوثة ضعيف. في فصولهم الباحثين المدرسة التقاط ما يصل إلى خلايا 50000 من العقدية المخضرة في 1m3.

يتم زرع مستعمرات Escherichia coli من وسط Endo في مرق اللاكتوز مع حمض البوريك أو في وسط المرارة اللاكتوزية ذات اللون الأخضر اللامع ، مسخن حتى 43-44 ° С (في حمام مائي) ، وبعد البذر مباشرة ، يتم وضع أنابيب دافئة في ترموستات في 43 ° C على 24 h. حمض البوريك والأخضر اللامع ، إضافة إلى الوسائط ، مثبطات للنباتات المصاحبة. يشير مظهر تكوين الغاز إلى وجود الإشريكية القولونية في ماء الاختبار. إذا لم يكن من الممكن أن تزرع في مرق اللاكتوز مع حمض البوريك ، يتم تحديد E. coli وفقًا لخاصيتين: تخمير اللاكتوز عند 44,5 ° C خلال 24 h والقدرة على تكوين الإندول. في هذه الحالة ، يتم تصنيف مستعمرات E. coli المشبوهة في أنابيب 2: واحدة مع وسيطة شبه سائلة مع اللاكتوز ، والثانية مع وسيط لتحديد الإندول (مرق Hottinger ، أو ماء بيبتون أو وسيط آخر يحتوي على التربتوفان) ، يتم إدخال ورقة مؤشر تحت أنبوب الاختبار indole والمحتضنة في 44,5 ° C. زرع في أنابيب الاختبار مع البيئة FKP-1 تحديد تبسيط منذ في هذا الوسط يحتوي على اللاكتوز والتربتوفان. ويرد ردا إيجابيا من تشكيل الغاز (التحلل اللاكتوز) والإندول (التخمير التربتوفان).

غريغرسن اختبار هذا الاختبار يمكن الاستعاضة عن غرام وصمة عار. انخفاض 3٪ مائي KOH على شريحة مستحلب كتلة البكتيرية مأخوذة من المتوسطة كثيفة. بعد بضع ثوان، بعد التحريك لمدة المخاطية الحلقات تمتد الغزل، مشيرا إلى أن مستعمرات تابعة لدراسة الأنواع سالبة الجرام. لا تتشكل غرام (+) البكتيريا المواضيع المخاطية.

الكاتلاز اختبار تطبيق قطرة من 1-2 3 بيروكسيد الهيدروجين٪ مباشرة على مستعمرة التحقيق. ظهور فقاعات يشير إلى أن البكتيريا المعزولة الكاتالاز.

ويتم اختبار اختبار أوكسيداز بها مع مستعمرات من الكائنات الحية الدقيقة التي تزرع على وسيط إندو. يتم نقل جزء المستعمرات المشبوهة إلى ورقة فلتر حلقة عقيمة مشربة كاشف: ثنائي ميثيل-ن-enilendiaminom ونفثول. إذا تزرع الكائنات الحية الدقيقة على فلتر، كان معزولا لون مستعمرة أوكسيديز من خلال 2-5 دقيقة تغيرت إلى الأزرق البنفسجي. لم يتم اتخاذ مثل هذه المستعمرات في الاعتبار في تحليل المياه. كما يمكنك تحديد ورقة مع مؤشر تراكب تصفية كامل مع المستعمرات نمت على ذلك. المستعمرات القولونية داكنة اللون الأحمر لا يتغير لونه (كما القولونية E. oksidazootritsatelny) وشملت ممثلين عن التلوث البرازي للمياه.

في الحالات المشكوك فيها ، في وجود مستعمرات وردية اللون أو عديمة اللون (سلبية اللاكتوز) لا تمتلك نشاط أوكسيديز ، يتم تحديد قدرة البكتيريا على تخمير الجلوكوز عند درجة حرارة 37 ° C وإظهار نشاط التحلل البروتيني على وسط Endo مع الحليب. يتم حساب المستعمرات على أنها BGKP ، إذا تم تشكيلها بواسطة قضبان سالبة الجرام ، والتي تخمر الجلوكوز إلى الحمض والغاز ولا تمتلك نشاطًا للبروتين.

قائمة الأدب الموصى بها

1. Mudretsova-Wiss، K.A.، Kudryashova، A.A، Dedyukhina، V.P. علم الأحياء الدقيقة والصرف الصحي والنظافة: دراسات. للجامعات. -7 إد. - M: دار نشر الأعمال الأدب ، 2001. - 388 مع.

2. علم الأحياء الدقيقة الصحي / N.V. بيليتوفا ، ر. كورنيليف ، إل. Kostrikina et al. Ed. SY Lyubashenko. - M .: Pishch.pr-st ، 1980.-352 with.

3. مارموزوفا إل. أساسيات علم الأحياء الدقيقة ، والصرف الصحي والنظافة في صناعة المواد الغذائية. - M: IRPO ، أكاديمية ، 2000. - 132 مع.

4. فومين جي. المياه. مراقبة السلامة الكيميائية والبكتيرية والإشعاعية وفقًا للمعايير الدولية: مرجع موسوعي. - 3 ed.، Pererab. وأضف. - M: دار النشر "حامي" ، 2000. - 848 مع.

5. أساسيات علم الأحياء الدقيقة ، علم الفيروسات والمناعة. إد. إيه. فوروبيفا ، يو. كريفوشينا. - M .: إتقان ، العالي. 2001.-224 مع.

6. علم الأحياء الدقيقة الصحي وعلم الفيروسات / Z.N. Kochemasova، S.A. Efremova ، AM Rybakov - M: الطب ، 1987. - 352 مع.

7. التحليل الصحي والميكروبيولوجي لمياه الشرب: مبادئ توجيهية. - م: المركز الفيدرالي للمراقبة الحكومية للصحة والوباء التابع لوزارة الصحة الروسية ، 2001. - 42 مع.

8. محدد البكتيريا بورغي. في 2-s.: Trans. مع الإنجليزية. / إد. جيه هولت وآخرون - م: مير ، 1997.

9. طرق علم البكتريا العام: في 3's t.- Per. من الانجليزية / إد. F. Gerhardt et al. - M: Mir، 1983.

إضافة تعليق

البريد الإلكتروني Ваш не будет опубликован. Обязательные поля помечены *